Q1:什么是内毒素？
A1:内毒素是一种复杂的脂多糖（LPS），存在于大多数致病性革兰氏阴性细菌的外膜上。虽然煮沸0分钟不会破坏内毒素的稳定性，但某些强氧化剂（如超氧化物、过氧化物和次氯酸盐）可以降解内毒素。
Q2:可接受的最大内毒素剂量是多少？A2:1EU大约相当于pg的大肠杆菌脂多糖--大约个细菌中的含量。人类只要接触到5EU/1kg的内毒素，就会出现症状。这些症状包括但不限于发烧、低血压、心率加快和尿量少。即使血液中含有小剂量的内毒素，也往往是致命的。FDA对在美国销售的药品规定了以下最高允许内毒素含量：1.药物（可注射，鞘内注射）-0.2EU/1kg体重2.药物（可注射，非鞘内注射）--5EU/1kg体重.无菌水-0.25-0.5EU/ml（取决于预期用途）Q:我应该选择哪种内毒素检测方法？
A:在决定使用哪种内毒素检测试剂盒之前，您需要考虑几个问题。首先，您要检测多少样本，检测频率如何？如果您只检测一两个样品，而且只检测一次，那么您可以考虑内毒素检测服务机构。如果您计划定期检测，那么您首先需要评估您目前拥有的设备。如果您有多种可用设备，请考虑您希望获得的结果类型。如果您必须获得定量结果，那么凝胶法试剂盒将无法满足您的需求，因为凝胶法检测只能得出定性的结果。检测灵敏度是另一个重要的考虑因素。Kinetic-QCL?动态显色LAL检测法和PyroGene?重组因子C检测法的灵敏度都可低至0.EU/mL。PYROGENT?-动态浊度LAL测定的读数可达0.01EU/mL。PYROGENT?凝胶法检测试剂盒可订购不同灵敏度的产品：0.0、0.06、0.和0.25EU/mL。如果您需要经常检测许多样品，那么您可能需要考虑购买尚未拥有的设备和软件。与PYROGENT?凝胶法相比，光度法和重组C因子法所需的上手操作时间更短，灵敏度更高。
Q4:进行Lonza细菌内毒素检测(BET)、LAL或PyroGene?重组因子C(rFC)内毒素检测需要哪些设备？
A4:不同的内毒素检测方法需要使用的设备可能也不同。如果使用PYROGENT?凝胶法检测，需要一个非循环水浴锅或一个能在7°C下加热的干热块。如果Kinetic-QCL?或PYROGENT?-检测，则需要吸光度酶标仪和内毒素检测分析软件，该酶标仪应具有振荡功能，能在7°C下孵育整个检测过程，并能在nm（用于Kinetic-QCL）或40nm（用于PYROGENT?-）波长下读取动力学数据。如果使用PyroGene?rFC检测，则需要使用配有80/nm滤光片的孵育荧光酶标仪。我们的所有试剂盒都需要使用漩涡混合器和标准实验室移液器。
Q5:在进行Lonza细菌内毒素检测(BET)、LAL或PyroGene?重组因子C(rFC)内毒素检测试验时，为什么要使用玻璃配件而不是塑料？
A5:内毒素在塑料表面的附着力比玻璃表面强。因此，我们建议在配制内毒素对照标准（CSE）稀释液时使用硼硅酸盐玻璃稀释管。在某些情况下，某些塑料可能被证明是可以接受的样品容器。虽然玻璃仍是首选的样品容器材料，但聚苯乙烯可能是第二选择，聚丙烯则是第三选择。一些客户也表示使用PET材料效果不错。如果您计划在检测前将样品保存一段时间，则应验证样品是否能在您计划使用的容器中保存，并确认样品中的任何内毒素在保存后都能被回收。
Q6:在使用Lonza细菌内毒素检测试剂盒(BET)、LAL或PyroGene?重组因子C(rFC)进行内毒素检测时，为什么要对标准内毒素(CSE)对照稀释液进行涡旋处理？
A6:内毒素会附着在玻璃表面，可以通过适当的涡旋来复溶，以确保等分到反应管或微孔板中的溶液浓度正确。在稀释之前，应将CSE小瓶涡旋15分钟。每次使用小瓶时都应重复此操作，而不仅仅是在复溶后。每次使用CSE稀释液前应至少涡旋1分钟。使用前最好立即将CSE稀释液涡旋几秒钟。
Q7:进行Lonza细菌内毒素检测(BET)、LAL或PyroGene?重组因子C(rFC)内毒素检测时，如何将EU/ml（内毒素单位）转换为ng/ml？
A7:根据内毒素来源的不同，从EU/ml到纳克的换算也会有所不同。FDA最初将内毒素单位(EU)定义为参考内毒素标准EC-2中0.2ng或5EU/ng的内毒素活性。将现行FDARSE,EC-6从EU转换为ng，转换量为10EU/ng。以前版本的BET85USP中规定，合适的CSE效价在2至50EU/ng之间。
Q8:在进行Lonza细菌内毒素检测(BET)、LAL或PyroGene?重组因子C(rFC)内毒素检测试验时，是否应该使用匹配的试剂、CSE？
A8:您需要使用匹配的试剂，以符合FDA对内毒素检测的要求。龙沙的每批LAL都使用美国参考标准EC-6进行功能测试。然后，通过与参考标准内毒素（RSE）平行测试，将该批次LAL与我们的对照标准内毒素（CSE）进行"匹配"。这种RSE/CSE相关性检测可确定该批次CSE与该批次LAL一起使用时的效力。RSE/CSE相关性测定的程序摘自美国食品及药物管理局（FDA）关于将嗜酸性卵母细胞裂解物检测法确认为人和动物肠外药品、生物制品和医疗器械最终产品内毒素检测法的指导原则。FDA指出，使用LAL生产商出具的质量证书，企业就无需自行进行RSE/CSE比对。龙沙提供的试剂盒包含适用于我们所有检测类型的匹配试剂，使您的内毒素检测更简单。
Q9:准备运行Lonza细菌内毒素检测试剂盒(BET)、LAL或PyroGene?重组因子C(rFC)时，如何确定CSE的效力？
A9:龙沙确定CSE效力的RSE/CSE操作见每种匹配试剂盒的CoA。一般来说，将多瓶CSE的内毒素稀释液与用RSE生产的一系列标准品进行未知物测试。将CSE稀释液的结果与RSE的结果进行比较计算，得出以EU/ml为单位的效力。对于凝胶法，终点的稀释倍数的几何平均数乘以灵敏度，即可确定以EU/ml为单位的效价。对于定量方法，对结果在所测RSE标准曲线范围内的稀释液进行平均，以确定以EU/ml为单位的效价。要计算每纳克的效价，效价要乘以复溶CSE所用的体积（例如5ml）和每个小瓶中冻干的相应ng内毒素。得出EU/ng。
Q10:在进行Lonza细菌内毒素检测(BET)、LAL或PyroGene?重组因子C(rFC)内毒素检测试验时，应该如何处理LAL试剂？
A10:LAL试剂应轻拿轻放。复溶后，轻轻倒置或旋转试剂瓶，试剂瓶中的内容物很容易溶解。涡旋或剧烈摇晃重组的LAL试剂会使其起泡，不利于内毒素检测。